ISSN 1995-4301(печатной версии)
ISSN 2618-8406
(электронной версии)
Актуальные выпуски:
Обзор краткого содержания статей
|
Выбор параметров просмотраВыбраны статьи автора: М.Н. Барамзин
2025 г., № 4 |
||||
Получение гетерологичных продуцентов рамнолипидов на основе Acetobacter aceti AlC1824 |
||||
| М.Н. Барамзин, С.Г. Литвинец |
||||
| ФГБОУ ВО "Вятский государственный университет" | ||||
| Рамнолипиды солюбилизируют нефтяные загрязнения почв, делая их более доступными для разложения почвенными микроорганизмами. В отличие от химических поверхностно-активных веществ, рамнолипиды безопасны для окружающей среды. Целью данной работы является получение гетерологичных продуцентов рамнолипидов на основе Acetobacter aceti AlC1824 с использованием искусственного промотора и оптимизация условий культивирования продуцента. Данный путь позволит избежать использования в качестве продуцента рамнолипидов условнопатогенного вида Pseudomonas aeruginosa, который может быть применён для биоремедиации почв. Кластер генов rhlAB амплифицировали из генома Pseudomonas aeruginosa B-6643 путём полимеразной цепной реакции. В p-AlT2 вектор встроили конструкцию, состоящую из кластера генов rhlAB и искусственного промотора. Путём кальциевой трансформации вставку ввели в клетки Acetobacter aceti AlC1824. С помощью колориметрической системы отбора рекомбинантных клонов – бело-голубой селекции отобрали 20 трансформантов. Обнаружили целевую вставку при помощи полимеразной цепной реакции у 7 трансформантов. В ходе индикаторного теста характерный осадок обнаружен у двух трансформантов: А4 и А8. Установлены подходящие для культивирования трансформантов источники азота (пептон) и углерода (маннитол). Определён ряд параметров: оптимальное значение кислотности среды – pH 5, оптимальное значение температуры культивирования у трансформанта А4 – 30 оС, у трансформанта А8 – 25 оС. Количество образуемых в оптимальных условиях рамнолипидов составило для А4 – 139,3±20,1 мг/мл, для А8 – 13,0±1,0 мг/мл. Экспериментально показана высокая отмывающая способность в отношении сырой нефти рамнолипидов гетерологичных продуцентов: А4 – 93,9±1,5% и А8 – 96,7±1,5%. | ||||
| Ключевые слова: рамнолипиды, гетерологичная экспрессия, биосурфактанты, оптимизация продуктивности, ацетобактерии, псевдомонады |
||||
| DOI: 10.25750/1995-4301-2025-4-107-113 | ||||
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.  |
||||
|
2024 г., № 2 |
||||
Получение гетерологичных продуцентов рамнолипидов для промышленного производства высокоэффективного биосурфактанта |
||||
| М.Н. Барамзин, С.Г. Литвинец, Е.А. Мартинсон |
||||
| ФГБОУ ВО "Вятский государственный университет" | ||||
| Рамнолипиды – перспективные гликолипидные биосурфактанты микробного происхождения, которые можно использовать в качестве препаратов для биоремедиации почв в случаях загрязнения нефтепродуктами. Экспрессия кластера генов биосинтеза рамнолипидов у основного продуцента – Pseudomonas aeruginosa – регулируется сигналами кворум-сенсинга (QS). Сложная регуляции биосинтеза не позволяет добиться высокого выхода продукта. Получение гетерологичных продуцентов рамнолипидов является перспективным путём по преодолению сложной QS-зависимой регуляции биосинтеза рамнолипидов, а также позволяет избежать применения условно-патогенной Pseudomonas aeruginosa для промышленного получения рамнолипидов. На основе плазмидного вектора pAl2–T с конструкцией из нативного промотора и генами rhlAB были получены гетерологичные продуценты на основе Escherichia coli BLWT с продуктивностью трансформанта E14 3,40±0,96 г/л; и на основе Pseudomonas viridiflava AlC1223 – с продуктивностью трансформантов P5, P6, P8 332,00±0,10, 200,00±0,10 и 180,00±0,10 г/л, соответственно. Наличие в экспрессирующем векторе генов rhlAB позволяет получить монорамнолипиды, пригодные для дальнейшего использования в качестве агента солюбилизации гидрофобных загрязняющих веществ, таких как нефтепродукты, в почвах, что позволит интенсифицировать процессы биоремедиации. | ||||
| Ключевые слова: рамнолипиды, гетерологичная экспрессия, псевдомонады, биосурфактанты, нефтедеструк- торы, гликолипиды |
||||
| DOI: 10.25750/1995-4301-2024-2-135-142 | ||||
| Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License. |
||||
|
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
|
||||||||
